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技术平台

五大表达系统的重组蛋白表达平台

蛋白表达平台拥有原核、真核、无细胞等六大重组蛋白表达系统,已成功为客户研发出3000余种重组蛋白产品,涵盖细胞因子、激素、酶、病毒抗原和人类疾病相关蛋白等类别。平台拥有50-500L 大规模发酵平台、1m2冻干机、1500bar高压均质机等,可进行10g级重组蛋白制备。改造的表达载体和优化的实验流程,可在最短时间获得最高的产量。

服务项目

无细胞蛋白表达 大肠杆菌蛋白表达 枯草芽孢杆菌蛋白表达 酵母细胞蛋白表达 哺乳动物细胞蛋白表达

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大肠杆菌表达系统

大肠杆菌表达系统是目前最常用,也是最经济实惠的蛋白表达系统,与其他表达系统相比具有遗传背景清楚,目的基因表达水平高,培养周期短,抗污染能力强等特点,是分子生物学研究和生物技术产业化发展进程中的重要工具。

华美的大肠杆菌表达平台可提供全方位的重组蛋白生产服务,在表达包括可溶性蛋白、包涵体、融合蛋白等方面,拥有丰富的经验和专业技术,能解决蛋白表达过程中的各种瓶颈问题。到目前为止,已为全球各地客户提供超过3000种蛋白。

服务特色:
1、His、GST、MBP等标签多种表达方式同时进行,确保获得最优质的蛋白;
2、保证蛋白为普通缓冲可溶;
3、纯化的蛋白经过ELISA,Western-blot,或者其它生物活性验证;
4、可提供详细的表达纯化条件,实验数据以及菌株。

酵母表达系统

酵母表达系统是一种最经济高效的真核蛋白表达系统,可以成功实现胞内表达或是分泌表达,且其放大培养基相对廉价,培养条件要求不高,适宜工业放大。与哺乳动物细胞表达系统一样,酵母蛋白表达系统能够对所表达蛋白进行例如糖基化、酰基化、脂基化、磷酸基化等保证蛋白天然构象的修饰,可用于制备非常接近天然蛋白的具有高附加值的蛋白原料。

武汉华美生物工程有限公司的酵母蛋白表达平台由多年从事酵母表达操作的实验人员组成,经验丰富,采用自行改造的高效分泌载体和宿主组合,可在最大程度上实现最高质量的蛋白表达。经客户反馈,以我平台所制备的蛋白原料为抗原所制备的单抗均具有很好的识别天然蛋白的优良特性。

服务特色:
1、专利的Biobrick技术,可以实现高效体外构建任意拷贝的基因剂量,实现表达量的提高,可成功用于工业菌种的改良优化;
2、采用自行改造的高效分泌载体:pPIC9K、pPIC9K高效融合载体、pPICZA、pGAPZa、pPaSUMO3,宿主GS115、KM71、X33的正交组合。PINK系统优化分泌表达信号肽。胞内表达采用自行改造的载体pPIC 3.5k载体和宿主GS115、KM71、X33的组合,可在最大程度上实现表达。
3、高效的种子筛选工作能使您所定制的蛋白在最短的时间内获得尽可能高的产量

哺乳动物细胞表达系统

哺乳动物细胞的表达产物在分子结构、理化性质和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质分子,可用于重组蛋白药物和诊断原料试剂盒的开发及应用等。

华美的哺乳动物细胞表达平台采用特有的哺乳动物细胞表达载体和多种转染方法的组合方式,并优化了表达条件,能在最短的时间内提供足量的重组蛋白,帮您快速获得满意的实验结果。

服务特色:
1、应用特有表达载体及磷酸钙转染法、脂质体转染法、阳离子聚合物转染法等多种转染方法组合,实验周期缩短,表达量显著提高;
2、可提供瞬时转染实验图片及纯化产物和稳定转染的细胞株;
3、表达条件优化,瞬时转染效率高达80%~90%;细胞稳定转染的筛选时间为1~2个月;
4、具备细胞大规模放大培养的能力,可提供mg级哺乳动物细胞表达蛋白。

杆状病毒-昆虫细胞表达系统

杆状病毒表达系统(Baculovirus Expression Vector System,BEVS)凭借其简易的流程、高表达水平及翻译后的修饰功能,可在短时间内制备大规模翻译后修饰的蛋白,被广泛应用于病毒疫苗开发(如流感病毒和HPV疫苗开发)、信号蛋白制备、细胞因子制备等。

杆状病毒-昆虫细胞表达平台主要采用AcNPV(苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒)-sf9(草地夜蛾细胞系)细胞和BmNPV(家蚕核型多角体病毒)-BmN细胞两种表达系统, 多表达系统、多宿主、多载体的选择性极大的提高了蛋白表达的成功率;同时采用交配辅助遗传整合克隆(MAGIC)系统,只需简单的细菌混合,就可以快速构建重组杆状病毒质粒,阳性率高,周期短。

服务特色:
1、多表达系统、多宿主、多载体的选择性极大的提高了蛋白表达的成功率;
2、采用交配辅助遗传整合克隆(MAGIC)系统,只需简单的细菌混合,就可以快速构建重组杆状病毒质粒,阳性率高,周期短;
3、可提供详细的表达纯化条件,实验数据以及高滴度的病毒毒株。

无细胞蛋白表达系统

无细胞蛋白表达系统又称为体外翻译系统,是模拟生物细胞的生命现象,重现胞内蛋白转录翻译过程。无细胞蛋白质合成体系以外源目的mRNA或DNA为蛋白质合成模板,通过人工控制补加蛋白质合成所需的底物和转录、翻译相关蛋白因子等物质,能实现目的蛋白质的体外蛋白合成。

金开瑞的无细胞表达平台可为您提供完善的技术服务,针对目的蛋白的特殊性质,专业解决蛋白表达相关难题,如蛋白产量较低、表达特殊蛋白(如膜蛋白、毒性蛋白等)、制备蛋白复合物、平行合成多种不同蛋白等。

服务特色:
1、与传统的蛋白表达系统相比,省略了耗时耗力的质粒转化、细胞培养、收集、破碎和离心等, 极大地提高了工作效率;
2、反应体系小,能同时平行合成多种不同的蛋白质;
3、反应周期短,能满足高通量配体筛选和蛋白质组学的科研要求;
4、开放的反应体系,便于改变各项反应条件,有利于调控基因的转录,蛋白质的合成和翻译后修饰,避免包涵体的形成;
5、稳定的反应体系,可以偶联其它工艺,形成自动化、程序化、规模化生产,加快重组蛋白的纯化、功能表征和后续的结构解析;
6、无细胞结构限制,可用于生产对宿主有毒害作用的外源蛋白,避免蛋白表达对宿主细胞的致死作用;
7、添加非天然氨基酸或同位素标记氨基酸,表达特殊蛋白;
8、对于多次跨膜或由于疏水性强导致的普通细胞系表达困难的项目有显著改善。