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化学发光

免疫检测系统的相关原理

抗原和抗体之间的特异性免疫反应主要包括间接法、双抗夹心法、竞争法、捕获法。

1、间接法

间接法通常用来检测特定抗体,其原理就是包被抗原,然后用发光基团或酶标记的抗抗体检测样本中抗体,基本原理见下图。间接法的优点:相对较方便,只要变换包被抗原就可以检测不同的项目。间接法的缺点:标本中的特异性抗体会竞争性的结合抗原,使结果出现假阴性。

采用间接法进行化学发光检测基本原理


2、双抗夹心法

双抗夹心法是检测抗原最常用的方法,其原理就是包被捕获抗体,然后与发光基团或酶标记的另一支抗体联合检测样本中抗原,基本原理见下图。

采用双抗夹心法进行化学发光检测基本原理


3、竞争法

竞争法是受检抗体和酶标抗体竞争性的与磁珠表面抗原结合。固相抗原竞争法基本原理如下图所示。结合于固相载体的酶标抗体与受检抗体的量呈反比。若受检样本中无抗体,酶标抗体能够顺利与抗原结合,出现强信号。若受检样本中有抗体,则竞争性的占去了酶标抗体与抗原的结合,酶标抗体的结合力减弱,信号强度减弱。

采用固相抗原竞争法进行化学发光检测基本原理


4、捕获法

血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在,后者会干扰IgM抗体的测定,因此测定IgM抗体多用捕获法。基本原理如下图所示,先将所有血清IgM(包括异性IgM和非特异性IgM)固定在固相上,去除IgG后测定特异性IgM。

采用捕获法进行化学发光检测基本原理