二氧杂环丁烷类化学发光体系

ALP标记的CLEIA所用底物为环1,22二氧乙烷衍生物，这是一类很有前途的发光底物，用于化学发光酶免分析底物而设计的分子结构中包含起稳定作用的基团——金刚烷基，其分子中发光基团为芳香基团和酶作用的基团，在酶及启动发光试剂作用下引起化学发光。最常使用的底物是AMPPD[32(2’2 spiroadam antane)242 methoxy 242(3’2 phosphoryloxy)2 phenyl 21,22 dioxetane]，中文名为：32(2’2螺金刚烷) 242甲氧基242(3’2 磷酰氧基) 2苯基21, 22环二氧乙烷)。在碱性磷酸酶（ALP）作用下，磷酸酯基发生水解而脱去一个磷酸基，得到一个中等稳定的中间体AMPD（半寿期为2～30min），此中间体经分子内电子转移裂解为一分子的金刚烷酮和一分子处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子，当其回到基态时产生470nm 的光，可持续几十分钟。AMPPD为磷酸酯酶的直接化学发光底物，可用来检测碱性磷酸酯酶或酶和抗体、核酸探针及其它配基的结合物。可检测到碱性磷酸酯酶的浓度为10-15mol/L。

基于AMPPD的微粒子化学发光检测系统的基本原理